一、微生物膜过滤系统操作前准备
1.环境准备：
在超净工作台或生物安全柜中操作，提前开启紫外灯灭菌30分钟，确保操作环境无菌。
检查操作台面是否整洁，避免杂物干扰。
2.器材准备：
准备过滤系统主机、无菌滤杯、滤膜、滤膜底座、无菌镊子、无菌培养皿、真空泵、无菌稀释液（如生理盐水或缓冲液）等。
检查滤膜是否完整无损，避免使用破损滤膜导致假阴性结果。
3.个人防护：
穿戴无菌手套、口罩和实验服，避免手或非灭菌物品接触滤膜、滤器内壁及培养皿内部。
1.滤膜安装：
使用无菌镊子夹取滤膜，确保光面朝上，平整放置在滤膜底座上。
安装滤杯并固定，确保滤杯与滤膜底座之间密封良好，避免漏气导致过滤失败。
2.连接真空泵：
将真空泵与滤杯通过管道连接，检查连接处是否紧密无漏气。
开启真空泵，检查系统密封性，确保无漏气现象。
三、样品过滤
1.样品准备：
混匀待检测样品，根据样品微生物负荷情况适当稀释（如高微生物负荷样品需稀释以降低滤膜堵塞风险）。
使用无菌操作技术将样品倒入滤杯中，体积通常不超过100mL/次。
2.过滤操作：
启动真空泵，开始过滤样品。若样品量较大，可分次过滤，避免滤膜堵塞。
观察过滤速度，若过滤过慢或无法过滤，检查管路连接是否漏气、滤杯密封性是否良好、样品是否含有较多不溶性颗粒或悬浮物等。
3.过滤完成：
过滤完成后，关闭真空泵。
使用无菌镊子取出滤膜，注意避免手或非灭菌物品接触滤膜表面。
四、微生物膜过滤系统滤膜转移与培养
1.滤膜转移：
将滤膜转移至预置培养基的平板上，确保滤膜与培养基紧密贴合且无气泡。
根据检测微生物种类选择合适的培养基。
2.培养条件：
将培养皿倒置放入适宜温度的培养箱中培养。
细菌通常在37℃下培养24-48小时，真菌在25-28℃下培养3-5天。具体培养时间和温度根据检测微生物种类而定。
五、微生物膜过滤系统结果观察与计数
1.结果观察：
培养结束后，取出培养皿观察滤膜上生长的菌落情况。
使用无菌操作技术对菌落进行计数和鉴定。
2.结果报告：
根据菌落计数结果和样品稀释倍数计算样品中微生物的含量和种类等信息。
报告结果时注明检测方法、培养条件、菌落计数结果及鉴定结果等信息。
更新时间：2025-12-08
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